Mission nationale de sauvegarde du patrimoine scientifique et technique contemporain

Description

Le microscope à fluorescence est un microscope à fond clair équipé d'une source lumineuse émettant un rayonnement intense. Une substance chimique est fluorescente quand elle absorbe une lumière d'énergie élevée de courte longueur d'onde (ex: 240 nm pour l'ultra-violet) pour ensuite réemettre une lumière visible d'énergie plus faible ayant un longueur d'onde plus grande (ex: 600 nm pour l'orange). Le microscope à fluorescence utilise les rayons ultraviolets produits par une lampe à vapeur de mercure pour exciter les pigments fluorescents contenus dans une préparation pour observer la lumière visible émise après avoir filtré les UV qui sont dangereux pour l'oeil par un système de filtres. Du fait de la faible longueur d'onde des UV, le pouvoir de résolution est élevé.

Utilisation

Le microscope à fluorescence permet d'observer des échantillons fluorescents. Sauf rares exceptions à l'état naturel, les molécules de la cellule ne sont pas spontanément fluorescentes. On peut les rendre fluorescentes selon le principe de l'immunofluorescence (IF), c'est-à-dire en les faisant réagir avec des anticorps spécifiques dirigés contre eux, et marqués de façon covalente par des colorants fluorescents (fluorescéine : émission verte ; rhodamine : émission rouge).